小鼠白三烯B4（LTB4）elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠白三烯B4（LTB4）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃顏色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白三烯B4（LTB4）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

　　樣本處理及要求：

　　1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　注意事項：

　　1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩，避免起泡。

　　2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。

　　3. 一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　4. 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。

　　5. 如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請乘以稀釋倍數(shù)。

　　6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應的稀釋液配制，不能混淆。

　　7. 底物請避光保存。